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1、聚合酶反应分析仪温度校准装置校准的范围
本规范适用于测量范围为(0~120)℃以内的聚合酶链反应分析仪温度校准装置的校准。
2、引用文件
本规范引用下列文件:
JJG 160-2007 | 标准铂电阻温度计检定规程 |
JJF 1030-2010 | 恒温槽技术性能测试规范 |
JJF 1527-2015 | 聚合酶链反应分析仪校准规范 |
YYT 1173-2010 聚合酶链反应分析仪
凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本规范;凡是不注日期的引用文件,
其最新版本(包括所有的修改单)适用于本规范。
3、术语
3.1聚合酶链反应分析仪(polymerase chain reaction analyzer)
基于聚合酶链反应(PCR) 技术原理,模拟DNA或RNA的复制过程,在模板、引物、聚 合酶等存在的条件下,特异扩增已知序列,对其进行检测分析的仪器设备。也称基因扩
增仪。
4、聚合酶反应分析仪温度校准装置校准的概述
聚合酶链反应分析仪温度校准装置由单通道或多通道测温模块、数据采集模块、数据线和显示器(计算机)等组成,其测温模块的结构能够模拟聚合酶链反应分析仪(以下简称PCR仪)样品反应管的外形结构,主要用于校准PCR仪的温度特性,其组成框图如
图1所示。
a) 测温模块 b) 数据采集模块 c) 显示器
图1PCR仪温度校准装置组成框图
5、计量特性
5.1 温度示值
PCR 仪温度校准装置温度示值的最大允许误差为±0.20℃。
注:上述指标不作为合格判定依据。
6、校准条件
6.1环境条件
6.1.1环境温度:(15~25)℃;
环境湿度:≤85 %RH。
6.1.2电测设备对环境温湿度等另有要求时,应满足其相应规定。
6.1.3校准时,供PCR仪温度校准装置、恒温设备和电测设备使用的电源应分别符合相应要求。
6.2测量标准及其他设备
校准时,可选用表1所示的测量标准及其他设备。
表1校准用测量标准及其他设备
序号 | 设备名称 | 技术要求 | 用途 | 备注 |
1 |
标准铂带电阻温度计 | 准确度等级:二等及以上 测量范围: (0~419.527)℃ |
温度标准器 |
可使用满足要求的其他测量标准 |
2 |
电测设备 |
0.005级。配接温度标准器后,最小分辨力相当于0.001℃。 | 与标准铂电阻温度计配套使用 |
3 |
恒温槽及等温块 | 恒温槽 | 温度范围: (0~120)℃ 温度均匀性:≤0.01℃ 温度波动性:≤0.01℃/10min 工作区域深度:≥300mm |
提供恒定温场 | |
等温块 | 温度均匀性:≤0.03℃ 温度波动度:≤ 0.02℃/10min | ||||
4 |
水三相点瓶 |
UF0.001℃ k=2 | 测量标准铂电阻温度计的水三相点值 |
7、校准项目和校准方法
7.1校准项目
PCR仪温度校准装置的校准项目为温度示值。
7.2校准方法
7.2.1校准前的检查
7.2.1.1外观检查
目测检查PCR仪温度校准装置应外观良好,各通道温度传感器无弯折、断裂、污染,传感器封装、引线插件接触良好。
7.2.1.2 显示功能检查
可在温度示值校准时进行检查。
PCR 仪温度校准装置各通道温度显示应符合其分辨力要求,显示数字及图像应清晰,小数点和状态显示应正确。当温度超出测温范围或传感器发生故障时,应能实时显示其相应的通道号。
7.2.2校准前的准备
a)开启电测设备进行预热,预热时间至少20min或满足其使用说明书的相应要求;
b)预先冻制好水三相点瓶;
c)将标准铂电阻温度计放入冻制好的水三相点瓶中,测量其水三相点值。将新测
得的水三相点值输入配套电测设备使用;
d)按恒温槽使用说明书的要求,保证其工作区域的液面处于规定液位;
e)备好图2所示的PCR仪温度校准装置校准用的全浸式专用等温块或局浸式专用等温块,并保持其内部清洁。
a) 局浸式等温块b) 全浸式等温块
图2 专用等温块示意图
f) 将PCR仪温度校准装置的测温模块安装于专用等温块中,如图3所示。测温模块的温度传感器应无缝隙置入等温块测试孔内,保证温度传感器与等温块贴合紧密。无自重结构的测温模块需在其上方加压封条,使其与等温块接触紧密。等温块内应填充脱脂棉、泡沫塑料、真空隔热板等绝热材料,使测温模块与外部环境绝热。
a) 局浸式等温块 b)全浸式等温块
图3 测温模块在专用等温块中的安装示意图
g) 将安装了测温模块的等温块放置于恒温槽内,等温块的浸没深度应不低于180mm。
h) 将标准铂电阻温度计插入专用等温块验证孔内,插入深度应不低于180mm, 其感
温部分应与等温块底部保持水平。
i)将PCR仪温度校准装置的测温模块与其主机相连,并开机预热,进入测量状态,预热时间至少10min。
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